[发明专利]一种碱性磷酸酶的提取方法

摘要

一种碱性磷酸酶的提取方法，属于酶学领域。所述方法如下：1、取新鲜猪（牛）小肠，刮取肠粘膜。2、将刮取下来的肠粘膜均匀的薄涂在平皿中于冻干机中进行冻干，冻干后磨成粉。3、将肠粘膜装入超临界CO₂萃取设备的进料釜中，萃取，完成后保留釜中肠粘膜粗粉。4、向肠粘膜粗粉中加入水，匀质，调pH6.5，加硫酸铵和丙酮，于4℃静置40min，9000r/min离心20min，取上清液加入丙酮，静置，离心，取最终的沉淀物冻干。本发明的优点是：肠粘膜经过冷冻干燥后，去除掉多余的水分，再经超临界CO₂萃取，去除掉多余的脂肪，同时实现了排除水分和脂肪的干扰，并且还具有一定的杀菌作用，较传统工艺要具有更好的碱性磷酸酶的提取效果。

主权项

1.一种碱性磷酸酶的提取方法，其特征在于：所述的方法具体步骤如下：步骤一：取新鲜猪小肠或牛小肠，清洗干净，刮取肠粘膜；步骤二：将刮取下来的肠粘膜均匀的涂在平皿中于冻干机中进行冻干，厚度为3~5mm，冻干后磨成粉，粒度不超过100目；步骤三：将上述磨成粉的肠粘膜装入超临界CO₂萃取设备的进料釜中，设置萃取压力为20MPa，分离压力为8MPa，萃取分离同时进行，总时间为1.5~2h，得到肠粘膜粗粉；步骤四：按照1：0.8：0.05：0.47的体积比取步骤三得到的肠粘膜粗粉、水、硫酸铵和丙酮，然后向肠粘膜粗粉中加入水，匀质，调节pH为6.5，加入硫酸铵和丙酮，于4℃静置40min，9000r/min离心20min，取上清液额外再加入其1.07体积的丙酮，于4℃静置40min，9000r/min离心20min，取最终的沉淀物冻干即可。