[发明专利]禽流感病毒H5N1假病毒及其制备方法与专用DNA片段无效
| 申请号： | 200910236005.3 | 申请日： | 2009-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN101693894A | 公开（公告）日： | 2010-04-14 |
| 发明（设计）人： | 邓宏魁;袁克湖;王宜;汪芳迅;尹晓磊;时艳 | 申请（专利权）人： | 北京大学深圳研究生院 |
| 主分类号： | C12N15/44 | 分类号： | C12N15/44;C12N15/63;C12N15/867;C12N7/00;C12N5/10;C12Q1/70;G01N33/569;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 518055 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 禽流感 病毒 h5n1 及其 制备 方法 专用 dna 片段 | ||
【权利要求书】：
1.一个DNA片段，其核苷酸序列如序列表序列2所示。
2.含有权利要求1所述DNA片段的重组载体。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体是将权利要求1所述的DNA片段插入pcDNA3.1的多克隆位点之间，得到的重组载体。
4.一种假病毒的制备方法，是如下方法1)或方法2)：
1)权利要求1所述的DNA片段和逆转录慢病毒载体导入受体细胞，得到假病毒；
2)权利要求1所述的DNA片段、禽流感病毒H5N1株囊膜蛋白NA基因和逆转录慢病毒载体导入受体细胞，得到假病毒。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述逆转录慢病毒载体中插入有报告基因；所述报告基因是分泌型胎盘磷酸酯酶基因、β-半乳糖苷酶基因、β-葡萄糖苷酸酶基因、萤火虫荧光素酶基因、海肾荧光素酶基因或绿色荧光蛋白基因；所述逆转录病毒载体是pNL4-3.luc.E-R-。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述方法1)中，权利要求1所述的DNA片段是通过权利要求2或3所述的重组载体导入受体细胞的；所述方法2)中，权利要求1所述的DNA片段是通过权利要求2或3所述的重组载体导入受体细胞的，禽流感病毒H5N1株囊膜蛋白NA基因是通过将禽流感病毒H5N1株囊膜蛋白NA基因插入pcDNA3.1的多克隆位点之间构成的重组载体导入受体细胞的。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述受体细胞是真核生物的细胞；所述真核生物的细胞为HEK-293T细胞。
8.权利要求4-7任一所述的方法制备的假病毒。
9.一种假病毒细胞模型，是将权利要求8所述的假病毒感染哺乳动物细胞得到的重组细胞；所述哺乳动物细胞为MDCK细胞。
10.权利要求8所述的假病毒或权利要求9所述的假病毒细胞模型在进行禽流感病毒中和抗体研究中的应用或者在禽流感药物筛选中的应用；所述禽流感药物为病毒膜蛋白抑制剂。
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