[发明专利]一种抑制髓过氧化物酶MPO的金枪鱼抗氧化肽的制备方法与应用有效
| 申请号： | 202111329213.5 | 申请日： | 2021-11-10 |
| 公开（公告）号： | CN114149490B | 公开（公告）日： | 2023-10-27 |
| 发明（设计）人： | 蔡冰娜;潘剑宇;孙恢礼;陈华;万鹏;陈得科 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C07K7/22 | 分类号： | C07K7/22;C12P21/06;C12N9/08;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/36;A23L33/18 |
| 代理公司： | 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 | 代理人： | 张丽 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抑制 过氧化物 mpo 金枪鱼 氧化 制备 方法 应用 | ||
1.金枪鱼抗氧化肽，其特征在于，所述抗氧化肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1、SEQ IDNO：2所示。
2.权利要求1所述金枪鱼抗氧化肽在抑制髓过氧化物酶MPO中的应用。
3.权利要求1所述金枪鱼抗氧化肽在制备抗炎抗氧化功能产品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述金枪鱼抗氧化肽能清除ABTS自由基和活性氧自由基。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述金枪鱼抗氧化肽能抑制MPO酶的氯化和抗氧化。
6.一种抗炎抗氧化功能产品，其特征在于，含有权利要求1所述金枪鱼抗氧化肽。
7.权利要求1所述金枪鱼抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)酶解：金枪鱼鱼糜，加入料液比为1/2-1/4，搅碎成匀浆液，调节pH 8.0-9.0之间，45-60℃水浴预热15min，加入碱性蛋白酶，加酶量为2000-4000U/g，酶解时间4-6h，酶解后沸水浴灭酶10min，冷却至室温，过筛、低温离心，超滤，收集3kDa组分，冷冻干燥得金枪鱼酶解物；
(2)分离纯化：金枪鱼酶解物采用凝胶色谱进行分离，以去离子水为洗脱液，流速5.0mL/min，收集具有最好清除ABTS自由基和活性氧自由基能力的活性组分；
(3)鉴定分析抗氧化活性组分；经HPLC-ESI-MS鉴定分析，采用分子对接方法，筛选与MPO结合能低的肽序列，根据对MPO酶的氯化和过氧化的抑制作用，以及ABTS自由基和活性氧自由基的清除能力，获得高活性的两个肽序列，即得到的金枪鱼抗氧化肽。
8.根据权利要求7所述金枪鱼抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述超滤是将上清液依次用0.2um，100kMWCO和3kMWCO超滤膜超滤。
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